Závěrečná zpráva grantu 032/2001/C/1.LF

Název projektu:Morfologické následky aplikace kainátu u perinatálně hypoxii vystavených potkanů
Hlavní řešitel:Prof. MUDr. Miloš Langmeier, DrSc.
Spoluřešitelé: Doc. MUDr. Dana Marešová, CSc.; MUDr. Kateřina Jandová; MUDr. Mikuláš Mlček, PhD.; MUDr. Iveta Valkounová; MUDr. Petra Benešová
Období řešení:2001-2003
Celková dotace:539 tis. Kč

Souhrn výsledků

Stanovením NADPH-diaforáza (NADPH-d) pozitivních neuronů jsme testovali vliv i.p. podaného kainátu (KA) a chronické hypoxie  na hippocampus a primární sluchový cortex. Od 2. do 17. dne věku byla mláďata laboratorního potkana, společně s matkou, vystavena vlivu hypoxie v hypobarické komoře v simulované výšce 7000 m, vždy 8 hodin denně. 18.den, tedy 1 den po skončení působení hypoxie, byl zvířatům jednorázově i.p. aplikován kainát (2,5 mg/kg. Ve věku 22, 90 nebo 360 dní byla zvířata byla v hluboké thiopentalové narkóze transkardiálně perfundována 4% paraformaldehydem. Kryostatové řezy byly barveny na NADPH-d pozitivní neurony, jejichž počet byl kvantifikován v jednotlivých částech hippocampu (CA1, CA3, hilu, dorzálním a ventrálním listu gyrus dentatus) a primární sluchové kůře.

1) Z výsledků je patrné, že KA aplikovaný hypoxickým mladým zvířatům (22 denním) snižuje počet NADPH-diaforáza pozitivních neuronů v hilu, dorzálním a ventrálním listu gyrus dentatus, zvyšuje počet NADPH-d pozitivních neuronů v primárním sluchovém kortexu a nevyvolává změny v CA1 a CA3 oblastech hippocampu.

2) Výsledky ukazují, že u 90 denních zvířat KA aplikovaný hypoxickým zvířatům snižuje počet NADPH-diaforáza pozitivních neuronů CA1 a CA3 oblastech, v hilu a ve ventrálním listu gyrus dentatus. V dorzálním listu gyrus dentatus a primárním sluchovém kortexu není rozdíl oproti kontrolám statisticky významný.

3) Z výsledků u 360 denních zvířat je patrné, že KA aplikovaný hypoxickým zvířatům nevede ke změnám denzitu NADPH-d pozitivních neuronů v CA1 a CA3 oblastech hippocampu, v hilu a ventrálním listu gyrus dentatus. Oproti tomu stoupá počet těchto neuronů v dorzálním listu gyrus dentatus a primárním sluchovém kortexu.

Studie naznačuje, že hypoxie stimuluje produkci oxidu dusnatého (NO) pravděpodobně vlivem na genovou expresi nitric oxid syntázy (NOS). KA pravděpodobně ovlivňuje syntézu NO vazbou na KA kanály (subpopulace non-NMDA receptorů). Naše výsledky svědčí pro to, že hypoxie snižuje denzitu KA receptorů, což může nepřímo vést ke snížené produkcí NO následně po aplikaci KA.

1. Langmeier, M., Folbergrová, J., Haugvicová, R., Pokorný, J., Mareš, P.:  Neuronal cell death in hippocampus induced by homocysteic acid in immature rats. Epilepsia, 44: 299-304, 2003. IF = 3,530
2. Benešová, P., Langmeier, M., Betka, J., Trojan, S.: Changes in number of nitrergic neurons following kainic acid administration and repeated long term hypoxia. Physiol. Res., in press. IF = 0,984