Závěrečná zpráva grantu 086/2003/C/FaF

Název projektu:Studium chirálních vlastností UDP-glukuronosyltransferas
Hlavní řešitel:Doc.Ing. Vladimír Wsól, Ph.D.
Spoluřešitelé: RNDr. Lenka Skálová, Ph.D.; Ing. Barbora Szotáková, Ph.D.; Mgr. Yogeeta Babú; Michal Němec
Období řešení:2003-2003
Celková dotace:260 tis. Kč

Souhrn výsledků


Reakce 2. fáze biotransformace nebo konjugační reakce tvoří důležitou metabolickou dráhu v biotransformaci xenobiotik, protože tím, že zvyšují jejich polaritu, usnadňují i jejich exkreci z organismu. Flobufen je nové nesteroidní antiflogistikum, patřící do skupiny derivátů aryloxoalkanové kyseliny. Toto léčivo představuje molekulu s jedním chirálním a jedním prochirálním centrem. Předchozí studie na různých živočišných druzích prokázaly, že hlavními metabolity flobufenu vznikajícími v první fázi biotransformace jsou dihydroflobufen a derivát kyseliny aryloctové, metabolit M-17203.
Cílem tohoto projektu bylo zjistit, zda UDP-glukuronosyltransferasy vykazují stereoselektivitu a určit, jakým typům konjugačních reakcí flobufen a jeho metabolity podléhají. Všechna měření byla provedena za použití vysokotlaké kapalinové chromatografie s UV i ESI-MS detekcí. Byla vyvinuta a optimalizována přímá HPLC metoda pro kvantifikaci glukuronidů flobufenu a jeho metabolitů. Pro tento typ studie byli vybráni samci potkana kmene Wistar. Při in vitro experimentech byla inkubována mikrosomální frakce jaterního homogenátu potkana s flobufenem, dihydroflobufenem a M-17203. Výsledky této studie prokázaly, že flobufen a M-17203 jsou vhodnými substráty pro UDP-glukuronosyltransferasy a tvoří glukuronidy, ale dihydroflobufen glukuronidaci nepodléhá. M-17203 je navíc konjugován s aminokyselinou taurinem. Enzymové kinetické studie se stejným modelovým systémem prokázaly, že UDP-glukuronosyltransferasy vykazují stereoselektivitu vůči S-flobufenu.

Výsledky projektu byly prezentovány formou publikace (1 publikace odeslaná do tisku) a posteru na mezinárodní konferenci. Výsledky jsou i součástí disertační práce a diplomové práce.