Závěrečná zpráva grantu 264/1999/B-BIO/PřF

Název projektu:Diversita jednobuněčných eukaryot: fylogenetická a taxonimická revize skupiny Trichomonadida
Hlavní řešitel:Doc.RNDr. Jan Tachezy, Ph.D.
Spoluřešitelé: Prof.RNDr. Jaroslav Kulda, CSc.; Doc.RNDr. Jaroslav Flegr, CSc.; RNDr. Ivan Hrdý, Ph.D.; Mgr. Pavel Suchan; Bc. Jitka Šedinová; Mgr. Vladimír Hampl; Ivan Čepička; Eva Božíková; Kateřina Kutišová; Petra Findová; Ondřej Šmíd; Mgr. Pavel Doležal; Mgr. Štěpánka Vaňáčová; Martin Vrlík; Ing. Jana Nebesářová, CSc.
Období řešení:1999-2001
Celková dotace:450 tis. Kč

Souhrn výsledků

Cílem této studie byla revize současného pohledu na fylogenezi a taxonomii třídy Trichomonadea, která zahrnuje volně žijící prvoky, komenzály bezobratlých i obratlovců i významné parazity zvířat a člověka. Studie byla založena především na molekulárně biologických metodách tj. sekvenování genů kódujících 16S rRNA, sekvenování oblasti ITS1-5.8rRNA-ITS2, a metodách DNA fingerprintingu, zejména RAPD (randomly amplified polymorphic DNA analysis). Nově popsané druhy a druhy, jejichž dřívější popis byl nejasný jsme studovali rovněž pomocí světelné a elektronové mikroskopie. Hlavní výsledky lze shrnout do následujících bodů: (i) Fylogenetická analýza 16S rRNA potvrdila časnou separaci dvou hlavních linií trichomonád, které representují rody Tritrichomonas a Trichomonas. Ve spolupráci se zahraničními laboratořemi, jsme toto základní rozdělení potvrdili analýzou genů pro enzym fumarázu třídy II a porovnáním charakteristických vlastností RNA polymeráz. (ii)  Prokázali jsme polyfyletický charakter rodu Monocercomonas. Zatímco monocerkomonády ze zažívacího traktu plazů se řadí k linii Tritrichomonadidae, monocerkomonády teplokrevných obratlovců se zařadily k linii Trichomonadidae. Rod Monocercomonas je charakteristický jednoduchou stavbou cytoskeletonu. Z našich výsledků je patrné, že k zjednodušení cytoskeletonu došlo sekundárně a to několikrát u nezávislých linií trichomonád. (iii) Dle fylogenetické analýzy zástupců rodů Hypotrichomonas a Trichomitus lze předpokládat, že tyto rody představují výchozí stupeň pro evoluci jak linie Tritrichomonadidae tak Trichomonadidae. (iv) Analýzou genu pro 16S rRNA jsme potvrdili, že Cochlosoma anatis, patří do třídy Trichomonadea, jak naznačovali některé ultrastrukturální studie. (v) Potvrdili jsme, že izoláty z ústní dutiny psů (Trichomonas canistomae) a koní (Trichomonas equibuccalis) jsou samostatnými druhy rodu Trichomonas. (vi) Popsali jsem nový druh Tetratrichomonas sp. ze zažívacího traktu Hylobates concolor. (vii) Pozoruhodným objevem je nález trichomonád rodu Tetratrichomonas v ústní dutině a bronších pacientů s chronickým onemocněním dýchacích cest. Jak morfologické tak molekulárně biologické metody ukazují na blízkou příbuznost těchto prvoků s komenzálem ptáků Tetratrichomonas gallinarum. (viii) Potvrdili jsme, že patogen skotu Tritrichomonas foetus a komenzál prasat Tritrichomonas suis jsou identické druhy a navrhujeme používat společné druhové jméno Tritrichomonas foetus pro izoláty z obou hostitelů.