Závěrečná zpráva grantu 057/2001/C/2.LF

Název projektu:Změny exprese chimerického genu TEL/AML1 v leukemických buňkách vlivem asparaginasy in vivo a v in vitro modelu
Hlavní řešitel:MUDr. Jan Trka, Ph.D.
Spoluřešitelé: MUDr. Jan Zuna, Ph.D.; MUDr. Ondřej Hrušák, Ph.D.; MUDr. Ondřej Krejčí; RNDr. Markéta Kalinová; Mgr. Jozef Madžo, Ph.D.; Doc. RNDr. Berta Otová, CSc.; Mgr. Júlia Starková
Období řešení:2001-2003
Celková dotace:558 tis. Kč

Souhrn výsledků

Zjistili jsme, že exprese genu TEL/AML1 se po podání L-Asp nemění. Tento výsledek má velký význam pro sledování residuální nemoci, protože částečně odpovídá na často kladenou otázku, zda hladiny MRN určené podle hladiny transkriptů hybridních genů nemohou být ovlivněny transkripčním stavem buněk po léčbě cytostatiky. Naše in vitro experimenty ukazují, že buňky, které terapii přežijí, exprimují hybridní gen TEL/AML1 na stejné úrovni jako před léčbou.
Dále jsme neprokázali korelaci mezi výskytem alergických reakcí na L-Asp (a tím pádem podání nižší dávky nebo alternativní lékové formy) a výsledkem léčby či hladinou residuální nemoci u TEL/AML1 positivních pacientů. Demonstrovali jsme v in vitro experimentech nutnost sériového podání L-Asp v léčebných protokolech, které vede k dlouhodobému potlačení proliferace TEL/AML1 positivních blastů.
Naše původní hypothesa, že zvýšená citlivost na L-Asp je u TEL/AML1 positivních blastů způsobena deregulací exprese genu pro AsnS, se nepotvrdila. Naopak jsme nalezli signifikantně vyšší hladiny transkriptu AsnS u pacientů s TEL/AML1 positivní ALL. Prokázali jsme, že míra indukce exprese AsnS po léčbě L-Asp je srovnatelná u TEL/AML1 negativních i positivních leukemických buněk. Relativně nižší exprese AsnS u podskupiny TEL/AML1 positivních pacientů (srovnatelná s hladinou exprese u ostatních ALL) predikovala špatnou prognosu.
Naše současná hypothesa, na jejímž potvrzení v současnosti pracujeme, předpokládá, že TEL/AML1 positivní buňky se snáze dostávají vlivem L-Asp do nutričního stresu a nepostupují do S fáze buněčného cyklu. Příčinou je pravděpodobně porucha metabolismu asparaginu a glutaminu.
Presentace výsledků
Publikace v zahraničních časopisech (IF Leukemia = 4.7; IF Cancer = 3.9)
1. Krejčí, O. et al.
Upregulation of asparagine synthetase fails to avert cell cycle arrest induced by L-Asparaginase in TEL/AML1-positive leukaemic cells. Leukemia Vol.18,(3):434-41(2004)
2. Madžo, J. et al.
Slower molecular response to treatment predicts poor outcome in patients with TEL/AML1-positive acute lymphoblastic leukemia: prospective real-time quantitative reverse-transcriptase polymerase chain reaction study. Cancer  Vol. 97,(1):105-13 (2003)
Přednáška v zahraničí
Krejčí, O,. et al.
Asparagine Synthetase Gene and TEL/AML1 Gene: Expression Kinetics after L-Asparaginase Administration in TEL/AML1-Positive Cells. 6th Congress of the European Hematology Association - The Hematology Journal Vol.1,(1):696 (Frankfurt, Německo, 2001)
Dále jsme výsledky práce přednesli celkem 8x na tuzemských konferencích a představili 3x formou posteru na zahraničním sjezdu.